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                    重慶3M測試片
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                    檢測試劑盒的雙抗夾心的實驗方法

                    2022-03-30

                    雙抗體夾心法是試劑盒中檢測抗原的常用方法:

                    1.將特異性抗體與固體載體連接形成固體抗體:洗滌除去未結合的抗體和雜質。

                    2.加入被檢標本:使其與固相抗體接觸反應一段時間,使標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。去除其他未結合的物質。

                    第三步,加入酶標抗體:將固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。完全清洗未結合的酶標抗體。此時,固體載體上酶的量與樣品中檢測物質的量正相關。

                    4.添加底物:夾心化合物中的酶催化底物成為有色產物。根據顯色反應的程度,可以定性或定量測定抗原。

                    在臨床檢測中,該方法適用于檢測蛋白質等各種大分子抗原,如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對被測抗原的外源抗體,就可以用來包被固相載體,制備酶偶聯物,建立這種方法。例如,抗體的來源是抗血清,用于包被和酶標記的抗體取自不同物種的動物。例如,在使用單克隆抗體時,一般選擇針對抗原上不同決定簇的兩種單克隆抗體,分別用于包被固相載體和制備酶偶聯物。這種雙位點夾心法具有較高的特異性,通過將被測標本與酶標抗體一起保溫,可用于一步檢測。

                    雙抗體夾心法檢測抗原的另一個注意點是類風濕因子(RF)的干擾。RF是一種自身抗體,主要為IgM型,可與各種動物IgG的Fc片段結合。如果用于雙抗體夾心檢測的血清樣本中含有RF,可作為抗原成分,同時與固相抗體和酶標抗體結合,出現假陽性反應。f(ab’)或Fab片段用作酶結合物的試劑,由于去除了Fc片段,可以消除RF干擾。

                    檢測試劑盒采購.jpg


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